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2025-04-16一、體內(nèi)哺乳動(dòng)物細(xì)胞微核試驗(yàn)
微核:染色單體或染色體的無(wú)著絲點(diǎn)斷片,或因紡錘體受損而丟失的整個(gè)染色體,在細(xì)胞分裂后期,仍然遺留在細(xì)胞質(zhì)中。末期之后,單獨(dú)形成一個(gè)或幾個(gè)規(guī)則的次核,被包含在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi),因比主核小,故稱為微核。
二、試驗(yàn)原理
凡能使染色體發(fā)生斷裂或使染色體和紡錘體聯(lián)結(jié)損傷的化學(xué)物,都可用微核試驗(yàn)來(lái)檢測(cè)。骨髓中嗜多染紅細(xì)胞為微核試驗(yàn)的首選細(xì)胞群。
三、試劑
小牛血清(滅活)、姬姆薩染液、1/15mol/L 磷酸鹽緩沖液(pH6.8)、Giemsa應(yīng)用液
四、測(cè)試方法
1.步驟:通過(guò)適當(dāng)?shù)耐緩绞箘?dòng)物接觸受試物,一定時(shí)間后處死動(dòng)物,取出骨髓,制備涂片,經(jīng)固定、染色,在顯微鏡下計(jì)數(shù)含微核的嗜多染紅細(xì)胞。
2.觀察:本法觀察含微核的嗜多染紅細(xì)胞。嗜多染紅細(xì)胞呈灰藍(lán)色,成熟紅細(xì)胞呈淡桔紅色。微核大多數(shù)呈單個(gè)圓形,邊緣光滑整齊,嗜色性與核質(zhì)相一致,呈紫紅色或藍(lán)紫色。
3.結(jié)論:如果受試物試驗(yàn)組與溶劑對(duì)照組相比,單一劑量法微核率有明顯增高;多劑量法的劑量組在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異,并有劑量—反應(yīng)關(guān)系則可認(rèn)為微核試驗(yàn)陽(yáng)性。
五、周期
檢測(cè)項(xiàng)目 | 測(cè)試周期(工作日) |
體內(nèi)哺乳動(dòng)物細(xì)胞微核試驗(yàn)驗(yàn) | 28 |
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