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微生物樣品取樣幾種較常見的表面取樣技術
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  • 2025-04-07

微生物樣品取樣幾種較常見的表面取樣技術 

①拭子法

進行定量檢測時,必須先用滅菌取樣框(塑料或不銹鋼等)確定被測試的區(qū)域。

棉花-羊毛拭子:用干燥的棉花-羊毛纏在長4cm,直徑1cm~1.5cm的木棒或不銹鋼絲上做成棉花-羊毛拭子。然后將拭子放在試管中,蓋上蓋子后滅菌。取樣時先將拭子在稀釋液中浸濕,然后在待測樣品的表面緩慢旋轉拭子平行用力涂抹兩次。涂抹的過程中應保證拭子在取樣框內。取樣后拭子重新放回裝有10ml取樣溶液的試管中。

藻酸鹽棉拭子:由海藻酸鈣羊毛制成。將海造酸鹽羊毛纏在直徑為1.5mm的木棒上做成長1cm~1.5cm、直徑7mm的拭子頭,滅菌后放入試管中。取樣步驟同①。取樣后放入裝有10ml的1+4Ringer氏溶液(含1%偏磷酸六納)的試管中。

② 淋洗法

用10倍于樣品的滅菌稀釋液(質量比)對樣品進行淋洗,得到10-1的樣品原液,這種取樣方法可適用于全禽、干果、蔬菜等食品。報告結果時,應注明該結果僅代表樣品表面的細菌總數(shù)。

③膠帶法

這種取樣方法要用到不干膠帶或不干膠標簽。不干膠標簽的優(yōu)點是能把取樣的詳細情況寫在標簽的背面,取樣后貼在粘貼架上。不干膠膠帶取樣后同樣需轉接到一個無菌粘貼架上。這種方法可用于檢測食品表面和儀器、設備表面的微生物。膠帶和標簽制成后,可用易揮發(fā)溶液進行短時間的滅菌。必須確保滅菌后的膠帶無菌或殘留的微生物失去活性。

膠帶或標簽的一端要向內彎回大約1cm左右以方便使用。取樣時,把膠帶從粘貼架上取下壓在待測物質表面,迅速取樣后,重新粘回到模板上。送到實驗室后,將膠帶(或標簽)從粘貼架上取下,壓在所需培養(yǎng)基表面。

④瓊脂腸法

瓊脂腸有無菌圓塑料袋(或塑料筒)和加入其中的無菌瓊脂培養(yǎng)基制成。可在實驗室制作,一些國家也有成品出售。使用時,在瓊脂的末端無菌切開,將暴露的瓊脂面壓在樣品表面,用無菌解剖刀切下一薄片,放在培養(yǎng)皿上培養(yǎng)。

⑤影印盤

影印盤是一種無菌的塑料盤,也可稱為“觸盤”,可以從許多生產廠商處買到。制作時按要求在容器*填滿足夠的瓊脂培養(yǎng)基,并形成凸狀面,需要時,將瓊脂表面壓在待測物表面。取樣后再放入適當?shù)臏囟扰囵B(yǎng)。

⑥觸片法

用一個無菌玻片觸壓食品表面,帶回實驗室。固定染色(如革蘭氏法)后在顯微鏡下檢測,也可以將取樣的玻片壓在倒有培養(yǎng)基的平板上,將細菌轉接到瓊脂表面,(用無菌鑷子)移去玻片后,培養(yǎng)平板。這種方法不能用于菌體計數(shù),但能快速判斷優(yōu)勢菌落的類型,這對生肉、禽肉和軟奶酪等食品更為適用。

⑦表層切片法

用滅菌解剖刀或鑷子切取一薄層表層樣品。這種方法較適用于家禽皮膚的取樣。將樣品放入裝有適當稀釋液和適當稀釋度的容器中,均質后得到初始濃度為10-1的樣品原液。

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